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磁珠法核酸提取儀的原理,你知道嗎?

日期:2021-01-05 16:17:42  閱讀數(shù):8995

磁珠法核酸提取原理是什么?核酸提取方法有哪些?關(guān)于核酸提取純化儀的二三事,本文為您一一介紹。

磁珠法核酸提取原理是什么?

磁珠法核酸提取的原理跟硅膠膜離心柱相同。

主要是通過(guò)運(yùn)用納米技術(shù)對(duì)超順磁性納米顆粒的表面進(jìn)行改良和表面修飾后,制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。

該磁珠能夠在微觀界面上與核酸分子特異性地識(shí)別和高效結(jié)合。

利用二氧化硅包被的納米磁性微球的超順磁性,在Chaotropic鹽(鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外加磁場(chǎng)的作用下,能從血液、動(dòng)物組織、食品、病原微生物等樣本中分離出DNA和RNA。

簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),磁珠法核酸提取的過(guò)程主要是裂解——結(jié)合——洗滌——洗脫。


核酸提取方法有哪些?

常用方法:

1、直接提取法,也稱(chēng)鳥(niǎo)槍法。

2、人工合成法:A反轉(zhuǎn)錄法,B化學(xué)合成法。

具體方法:

1、濃鹽法

2、陰離子去污劑法

3、酚/氯仿抽提法

4、水抽提法

5、醇沉淀法

6、熱裂解堿法

7、煮沸裂解法

8、納米磁珠法

9、還有超聲法、反復(fù)凍融法、酶解法及低滲裂解等等多種方法。

實(shí)驗(yàn)室常用的DNA提取方法:

1、Chelex100法:在提取DNA時(shí),加入Chelex100(由苯乙烯、二乙烯苯共聚體組成,含有成對(duì)的亞氨基二乙酸鹽離子,起著螯合基團(tuán)作用,對(duì)多價(jià)金屬離子有極強(qiáng)親和力),螯合了金屬離子,防止了DNA降解,提高了PCR擴(kuò)增成功率。

2、有機(jī)法:指用平衡酚(又叫飽和酚)、氯仿等按不同比例混合,采用不同方法提取DNA。

3、磁珠法:(異)硫氰酸胍(GuSCN)是強(qiáng)烈蛋白變性劑,不破壞蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu),能破壞細(xì)胞膜及核膜蛋白,并使核酸酶失活,釋放DNA。磁珠可以特異性吸附DNA,與DNA結(jié)構(gòu)及片段大小無(wú)關(guān)。

4、鹽析法:溶解紅細(xì)胞后,離心沉渣用PK消化,用大約6M飽和NaCl沉淀蛋白質(zhì),離心上清中DNA用無(wú)水乙醇沉淀,用TE溶解。

5、NaOH法:強(qiáng)堿溶解、變性蛋白質(zhì),破壞細(xì)胞膜及核膜,變性核酸酶,釋放DNA,NaOH不破壞DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)。

好的,以上內(nèi)容就是關(guān)于核酸提取的介紹說(shuō)明,希望本文內(nèi)容對(duì)您有所幫助。


 
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